RESUMO

Herbaspirillum seropedicae é uma bactéria diazotrófica endofítica gram negativa, que pertence a classe das betaproteobactérias. H. seropedicae coloniza endofiticamente raízes de gramíneas como milho, sorgo e cana de açúcar de forma não invasiva e não patogênica (BALDANI et al., 1986). Organismos fixadores de nitrogênio possuem importância econômica e ambiental, podendo minimizar a necessidade do uso de adubos nitrogenados, e podendo promover o crescimento de plantas através da produção de alguns fitormônios. Os mecanismos moleculares envolvidos na adesão e colonização de vegetais por microrganismos tem sido estudados, visto a importância econômica da atividade agropecuária (DAZZO, 1987). Os LPS são macromoléculas encontradas exclusivamente formando a monocamada da membrana externa de bactérias gram-negativas (COLLINS & FERRIER, 1995). A ramnose é um dos principais constituintes do LPS da estirpe selvagem SMR1 de H. seropedicae (SERRATO, 2008). A mutação nos genes rfbB e rfbC, envolvidos na biossíntese de ramnose, alterou drasticamente a composição e estrutura do LPS de H. seropedicae, e como consequência diminuiu a capacidade de adesão e colonização endofítica desta bactéria (BALSANELLI et al., 2010). Também foi observado que a expressão dos genes rfb é regulada pelos níveis de cálcio (BALSANELLI et al., 2010). Apesar da importância dos genes rfbB e rfbC na biossíntese de LPS, sabe-se que esses genes não devem estar envolvidos somente com a biossíntese de LPS. H. seropedicae tem uma serie de genes envolvidos especificamente na síntese de LPS, o gene rfaL, codifica para uma enzima chamada de O-antigeno ligase envolida na montagem da molécula de LPS, Portanto o objetivo desse projeto foi construir uma fusão plasmidial entre o gene rfaL o gene marcador lacZ e verificar se a expressão desse gene é regulada por cálcio. Para essa análise foram construídas 4 fusões plasmidiais: pLig1 (rfaL::lacZ integro), pLig2 (rfaL::lacZ com deleção de 200pb), pLig3 (rfaL::lacZ com deleção de 400pb) e pLig4 (rfaL::lacZ com deleção de 600pb), estas fusões foram transformadas em H. seropedicae e a expressão dessas fusões está sendo analisada após o cultivo das bactérias na presença e ausência de cálcio.

Palavras-chave: Herbaspirillum seropedicae, Interação Planta-Bactéria, Lipopolissacarideo