RESUMO

O Trigo cv. CD120, uma variedade de origem COODETEC, foi selecionado entre cinco outros por mostrar a capacidade de manter a interação benéfica com H.seropedicae em experimentos in vitro e produtividade quando sementes são inoculadas com a bactéria na ausência de ureia. O objetivo deste trabalho foi iniciar os estudos proteômicos da cultivar de trigo quando in vitro co-cultivados com H.seropedicae para verificar a expressão diferencial de proteínas de raízes e parte aérea. Para isso, as plântulas de trigo obtidas de cultura de embriões maduros (Zadok 12) foram transferidas para 10 mL de meio MS líquido 1/10 em tubos de ensaio. Após 24 horas, os tubos foram inoculados com 107 células / mL de H.seropedicae e permaneceu durante 7 dias em co-cultivo. Como controle plântulas não inoculado seguiram o mesmo tratamento. No final do período experimental as plântulas foram tomadas em triplicata, para separar em parte aérea e raízes e proceder a extração de proteínas. A concentração de proteínas foi determinada pelo protocolo do ácido Bicinchoninico. Fitas de PAGE de pH imobilizado (Immobiline DryStrip – GE Health Care) pH 3-10, 7 cm, e um SDS-PAGE 12% foram utilizados para a primeira e segunda dimensão, respectivamente, para o gel bidimensional (2DE). Após ser corado com Coomassie G-250, as imagens foram analisadas por software ‘Imagem Mestre 2D platinum' v.6.0. O protocolo de extração de proteína apresentou um rendimento de 8% e boa reprodutibilidade. A na´lise da imagem mostrou que cerca de 105 pontos de proteínas (‘spots') foram detectados nos géis controle e inoculado de parte aérea e 90 spots para o gel do experimento com raiz. Neste último, não foram observadas ‘spots' com peso molecular maior que 70kDa. Sete ‘spots' foram mais expressos na parte aérea das plântulas de CD120 inoculadas. Nenhum ‘spot' teve expressão aumentada no gel da parte aérea controle. Entretanto 5 ‘spots' foram exclusivamente expressos no gel da parte aérea de plântulas controle contra apenas 2 exclusivos nos géis da parte aérea inoculada. Um número de 4 ‘spots' foi mais expresso no controle nos géis de raiz, enquanto que nos geis da raiz de plântulas inoculadas 3 spots foram mais expressos. Sete spots distintos entre raiz de plântulas controle e inoculada foram verificados. A partir destes dados podemos avaliar que a raiz apresentou maior efeito da inoculação da bactéria que a parte aérea nestes estágios iniciais da associação benéfica. Sendo o um número pequeno de spots com expressão diferencial (

Palavras-chave: Trigo, Bactéria Promotora do Crescimento Vegetal, Proteoma Diferencial