CARACTERIZAÇÃO IMUNOQUÍMICA DE ANTICORPOS MONOCLONAIS CONTRA TOXINAS DO VENENO DA ARANHA LOXOSCELES SP.

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Aluno de Iniciação Científica: Sabrina Karim Silva (IC-Voluntária)

Curso: Enfermagem (MT)

Orientador: Larissa Magalhães Alvarenga

Co-Orientador: Juliana Ferreira de Moura

Colaborador: Alessandra Becker Finco, Rafaela Lenzi Fogaça,

Departamento: Patologia Básica

Setor: Setor de Ciências BiológicasIsabel Biasi Yamanaka

Área de Conhecimento: 20000006


RESUMO

Loxoscelismo é o termo que designa acidentes causado por aranhas do gênero Loxosceles, popularmente conhecidas como "aranha marrom". Esse acidente é caracterizado por causar lesões cutâneas necróticas degenerativas e/ou falha da função renal e distúrbios hematológicos. O tratamento de pessoas com suspeita de acidente por Loxosceles deve ser através da administração do soro antiloxoscélico, que possui sua eficácia até 72 horas. A equipe de saúde enfrenta dificuldades em identificar precocemente o loxoscelismo, porque não há testes específicos para identificação das toxinas no sangue de pacientes acidentados. O objetivo desse trabalho, portanto, é caracterizar anticorpos monoclonais específicos contra toxinas dos venenos de aranha do gênero Loxoceles. Para isso, anticorpos foram produzidos previamente, a partir da fusão de células do baço de um camundongo BALB/C fêmea imunizado com o veneno de Loxosceles intermedia, que originou hibridomas secretores de anticorpos monoclonais. O hibridoma 4F10A12 foi escolhido por apresentar reatividade relevante nos testes de ELISA frente aos três venenos das principais espécies de importância médica no Brasil (Loxosceles intermedia, Loxosceles gaucho e Loxosceles laeta). Os anticorpos secretados pelo hibridoma 4F10A12 foram purificados por cromatografia de afinidade em Sepharose-Proteína-G. A purificação originou o mAb12, com pureza comprovada por corrida eletroforética em gel de poliacrilamida. Através da técnica de ELISA foi possível verificar que o monoclonal mAb 12 reconhece proteínas das três espécies principais de Loxosceles encontradas no Paraná. Como perspectiva para esse trabalho tem-se a realização de Western blotting, que irá aferir quais proteínas o monoclonal mAb12 está reconhecendo. O trabalho final irá contribuir para a construção e validação do teste diagnóstico para Loxoscelismo baseado no reconhecimento de proteínas específicas presente nos soros de pacientes através do monoclonal mAb12.

Palavras-chave: Anticorpo Monoclonal, ELISA, Loxosceles intermedia