AVALIAÇÃO BIOQUÍMICA DOS EFEITOS DO CÁDMIO EM EMBRIÕES DE GALLUS GALLUS
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Aluno de Iniciação Científica: Gisleine Jarenko Steil (PIBIC/CNPq)
Curso: Ciências Biológicas (N)
Orientador: Claudia Feijó Ortolani-Machado
Co-Orientador: Francisco Filipak Neto
Departamento: Biologia Celular
Setor: Setor de Ciências Biológicas
Área de Conhecimento: 20000006
RESUMO
O cádmio é um metal altamente tóxico, capaz de causar efeitos adversos em uma ampla variedade de animais, incluindo embriões de aves. Estes são empregados como modelo na toxicologia, pois são muito sensíveis à ação de contaminantes. Considerando que a desregulação do potencial redox nas células é um importante mecanismo de toxicidade da maioria dos contaminantes conhecidos, assim como o cádmio, a investigação do sistema antioxidante mostra-se útil na determinação dos efeitos tóxicos do cádmio em embriões de ave. Assim, o objetivo do presente trabalho foi a adequação de protocolos para determinação das atividades enzimáticas da superóxido dismutase e catalase, bem como da concentração de glutationa e de peróxidos lipídicos em embriões de aves com 3 e 7 dias de desenvolvimento e, posteriormente, avaliar os efeitos de duas concentrações do cloreto de cádmio (CdCl2) nos embriões. Os ovos foram divididos em 3 grupos e expostos através da injeção, na câmera de ar do ovo, de 100 µl de CdCl2 a 5 µM e a 50 µM. O grupo controle recebeu o veículo empregado na preparação das soluções de cádmio (tampão fosfato salina, PBS). Após a exposição, os ovos foram incubados durante 3 e 7 dias, lavados com PBS e armazenados a -80 °C. Para as análises, os embriões foram homogeneizados em PBS, e o homogenato centrifugado e aliquotado. A concentração de proteínas foi determinada pelo método de método de Bradford (1976) e serviu de base para as padronizações. Verificou-se que é possível avaliar a concentração da glutationa por método colorimétrico com DTNB (ácido 5,5'-ditiobis-2-nitrobenzóico) para embriões de 3 e 7 dias, porém, a atividade da catalase não é detectável para embriões com três dias de desenvolvimento. A partir dessa fase do projeto, os protocolos para as análises bioquímicas das enzimas superóxido dismutase, bem como da peroxidação lipídica pelo método FOX e carbonilação de proteínas estão sendo adaptados para serem utilizados em embriões de aves.
Palavras-chave: Embrião de Ave, Cádmio, Estresse Oxidativo