RESUMO

A Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) é uma técnica amplamente utilizada na área de produtos naturais, tanto no isolamento dos metabólitos secundários em extratos vegetais, como na identificação e quantificação desses compostos isolados em outros extratos vegetais. Aqui está apresentado o trabalho com duas espécies vegetais: Lonchocarpus filipes e Schinus terebinthifolius. A espécie L. filipes, estudada anteriormente em nosso grupo, forneceu 8 flavonoides pertencentes a classe dos dibenzoilmetanos, cuja estrutura é muito semelhante a de fotoprotetores sintéticos. Pela técnica de CLAE, buscou-se identificar no extrato diclorometânico (ED) das raízes de L. filipes os 8 flavonoides previamente isolados e para quantificação utilizou-se os 4 com maior massa. O ED e os flavonoides de L. filipes foram analisados por CLAE-DAD em uma coluna RP18 X-Terra, 5µm (250 mm x 4,6 mm), observando que dentre os flavonoides de maior massa (LF-1, LF-2, LF-6 e LF-8) apenas os LF-1 e LF-8 apresentaram pico cromatográfico com pureza suficiente para a quantificação. A quantificação foi realizada utilizando o método do padrão externo, com construção de suas respectivas curvas de calibração em função da área média do pico versus a concentração injetada, nas mesmas condições utilizadas para a análise do extrato das raizes. Uma solução estoque de 1,0mg.mL-1 de cada padrão, foi preparada e solubilizada em acetonitrila. Solução padrão cobrindo o espaço linear em 6 níveis de concentração ( 0,01; 0,05; 0,010; 0,25; 0,50 e 1,00 mg mL-1) foram preparadas a partir da solução estoque e o volume final ajustado para 1 mL, em triplicata. Obteve-se em cada curva um R2 de 0,9979 para LF-1 e 0,9999 para LF-8, quantificando no extrato de raízes de L. filipes as massas de 13,62 mg de LF-1 e 2,16mg de LF-8 em 100mg do extrato. A espécie S. terebinthifolius apresenta atividade antimicrobiana e análise por CLAE das frações (1-5) do extrato metanólico das folhas da planta em ambiente natural e em condições axênicas foram realizadas comparando com padrões isolados da planta (ácido gálico, galato de metila, galato de etila, quercetina e catequina). Análises dos padrões e das frações foram realizadas na condição gradiente MeOH:H2O 5:95 a 100:0 em 60 min., fluxo 1 mL.min-1, com a mesma coluna descrita acima, usando como comparativo o tempo de retenção e o espectro no ultravioleta. Os resultados evidenciaram que apenas o galato de metila estava presente tanto nas frações 4 e 5 como no extrato da planta axênica, e que estas amostras foram as que apresentaram maior atividade biológica.

Palavras-chave: CLAE, Flavonoides, Lonchocarpus