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Título
PADRONIZAÇAO DE METODOLOGIAS DE CULTIVO CELULAR E DE BIOLOGIA MOLECULAR PARA A DETECÇÃO DE VÍRUS RESPIRATÓRIOS

Aluno: Bruna Amaral Lapinscki - PIBIC/UFPR-TN - Curso de Biomedicina (MT) - Orientador: Sônia Mara Raboni - Departamento de Saúde Comunitária - Área de conhecimento: 21201013 - Palavras-chave: influenza; shell vial; rt-pcr.

A Influenza, gripe, é uma doença respiratória infeciosa aguda de disseminação global causada pelos vírus Influenza A, B e, em menor quantidade, C. É um grande problema de saúde pública mundial, seja pela epidemia sazonal que acomete anualmente 10% da população mundial - dos quais crianças, idosos, imunodeprimidos e pacientes com doenças crônicas são os grupos mais susceptíveis à manifestação da forma severa da doença com evolução para síndrome respiratória aguda grave, responsáveis por altos números de internação e óbito -, seja pela sua alta potencialidade em gerar pandemias devido a inserção de novos subtipos resultantes das constantes mutações genéticas a que seus vírus estão expostos ou mesmo pela alta virulência de algumas variantes virais. O diagnóstico rápido através de técnicas moleculares ou por detecção de antígenos virais é imprescindível na resposta terapêutica e no combate à propagação da infecção, em contrapartida apenas o isolamento viral é capaz de fornecer dados para vigilância epidemiológica, identificar sorotipos circulantes na população, diagnosticar infecções por vírus atípicos, fornecer isolados virais para ensaios fenotípicos de susceptibilidade a antivirais, sequenciamento genético e análises antigênicas. Uma vez que não há ferramentas ou estratégias capazes de eliminar completamente a transmissão, estudos envolvendo a caracterização epidemiológica, clínica e molecular destes agentes infecciosos, assim como a avaliação de diferentes metodologias diagnósticas, são imprescindíveis para a introdução de medidas de intervenção terapêutica e dos serviços de vigilância em saúde visando o controle da Influenza. Desta forma este projeto tem como objetivo padronizar e avaliar a metodologia de detecção viral através de cultivo celular e compará-la com metodologias de diagnósticos por biologia molecular, através da padronização da técnica de centrifugação rápida (Shell Vial) para o isolamento do vírus Influenza de amostras clínicas do laboratório de Virologia do HC-UFPR, de extração do genoma viral das amostras clínicas e do sobrenadante de cultivo celular, da realização de reação de amplificação de genoma viral, da subtipagem do vírus Influenza A por PCR em Tempo Real e da comparação dos resultados obtidos por cultivo celular com as metodologias de diagnóstico da rotina do Laboratório de Virologia HC-UFPR.