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Título
COLEÇÃO MICROBIOLÓGICA DE LEVEDURAS NEGRAS DE INTERESSE CLÍNICO E BIOTECNOLÓGICO
Aluno: Bruna Bordim - PIBIC/Fundação Araucária - Curso de Biomedicina (MT) - Orientador: Vania Aparecida Vicente - Departamento de Patologia Básica - Área de conhecimento: 21202001 - Palavras-chave: cromoblastomicose; leveduras negras; coleção biológica - Coorientador: Renata Gomes Rodrigues - Colaborador: Caroline Elise Waculicz-Andrade; Jason Lee Furuie.
Introdução: Os fungos responsáveis pela Cromoblastomicose em humanos são pertencentes à família Herpotrichiellaceae. A deposição de melanina em sua parede celular confere a esse microorganismo fotoproteção e também é um fator de virulência. Lesões cutâneas e subcutâneas contendo nódulos e placas verrucosas, são as principais características da doença. Apesar desta doença ser considerada como endêmica em regiões tropicais e subtropicais, informações sobre a sua epidemiologia são insuficientes, sendo necessário mais estudos sobre este assunto. A recuperação de isolados ambientais e clínicos visa contribuir para a consolidação e manutenção do centro de coleção de cultura Laboratório de Microbiologia Molecular LABMICRO/UFPR. Métodos e Resultados: A manutenção de culturas do Laboratório de Microbiologia Molecular LABMICRO/UFPR, vem sendo mantida por meio de cultivo em diferentes meios de culturas (Ágar Sabouraud e Ágar Extrato de Malte 2%) em tubos de ensaio inoculados e encubados em estufas de cultivo a 28ºC; tubos de ensaio conservados com a utilização de óleo mineral e água destilada. Sendo extraído o DNA dos isolados e seqüenciado a região ITS do rDNA. Até o momento foram recuperados 240 linhagens de diferentes áreas endêmicas, sendo 25 linhagens ambientais procedentes de coleta de solo, água e matéria orgânica obtidos em áreas endêmicas. Também foram recuperadas 20 linhagens clínicas coletadas de pacientes com Cromoblastomicose no Hospital de Clínicas da UFPR (HC-UFPR). Estes fungos estão sendo mantidos no projeto piloto do centro de coleção de culturas Laboratório de Microbiologia Molecular LABMICRO/UFPR sob os diferentes métodos de conservação: repique contínuo, óleo mineral e água destilada. O centro de coleção também já recebeu 48 linhagens oriundas do Maranhão, obtidos através de pacientes com Cromoblastosmicose, além de 127 de área endêmica de produção de coco de babaçu, sendo estas já devidamente submetidas aos métodos de conservação. Destes 175 isolados já tiveram seu DNA extraído e a região ITS seqüenciada. Conclusão: O sequenciamento de DNA dos isolados clínicos e detalhada análise filogenética são aspectos de total importância para que se possam desenvolver protocolos de diagnósticos mais eficazes para patologias como a cromoblastomicose. Estudos a nível molecular também auxiliam no estudo de novas terapêuticas para esta doença. Em relação ao centro de cultura, os microorganismos estão sendo mantidos em diversos métodos de cultivo para garantir sua disponibilidade para pesquisas e estudos futuros.