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Título
PESQUISA DE NEOSPORA CANINUM E TOXOPLASMA GONDII EM SÊMEN DE TOUROS

Aluno: Luiz Felipe Silva Weber - PIBIC/CNPq - Curso de Medicina Veterinária - Curitiba (MT) - Orientador: Rosangela Locatelli Dittrich - Departamento de Medicina Veterinária - Área de conhecimento: 50503030 - Palavras-chave: imunofluorescência indireta; cultivo celular; pcr - Coorientador: Ana Paula Brenner Busch - Colaborador: Marcos Vinicius Ferrari, Marília de Oliveira Koch, José Eduardo Rodrigues Ribeiro e Silva.

A neosporose e a toxoplasmose são doenças abortivas causadas pelos protozoários Neospora caninum e Toxoplasma gondii, respectivamente. Possuem impacto econômico na bovinocultura e distribuição mundial. A toxoplasmose é uma zoonose. O objetivo do trabalho foi isolar N. caninum e T. gondii em sêmen de touros. No presente estudo foram avaliados 101 touros, procedentes de 11 propriedades localizadas nas mesorregiões Centro-Oriental (quatro) e Metropolitana de Curitiba (quatro), no Paraná, e região Serrana de Santa Catarina (três). Os touros são de diferentes raças e idades, criados para a reprodução em monta natural. O sangue foi coletado em tubos sem anticoagulante. No soro foi realizada a pesquisa de anticorpos anti-N. caninum e anti-T. gondii pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI, título de 1:50). Em 15 touros foram realizadas coletas pareadas de sangue (tubos sem anticoagulante) e sêmen (eletroejaculação). As amostras foram processadas no Laboratório de Patologia Clínica Veterinária da UFPR. No sêmen foi realizada a técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) para ambos parasitos. As alíquotas de sêmen também foram inoculadas em células Vero para o isolamento. Na PCR, foram utilizados os primers Np6 e Np21 (N. caninum), TOX4 e TOX5 (T. gondii) e ITS2 e ITS5 (ambos). A soroprevalência foi de 14,9% (15/101) para N. caninum e 41,6% (42/101) para T. gondii. Dos 15 touros que foram realizadas coletas pareadas (sangue e sêmen) foram observados três (20%) soropositivos para N. caninum, sete (46,7%) soropositivos para T. gondii, dois (13,3%) soropositivos para N. caninum e T. gondii e três (20%) soronegativos para ambos. Os resultados obtidos no isolamento para 11 amostras foram: quatro (26,7%) com efeito citopático, taquizoítas e infecção de 90 a 100% da monocamada em 30 a 45 dias; duas (13,3%) com infecção de 60% em 80 a 90 dias; três (20%) com infecção de 20% em 90 dias e duas (13,3%) sem efeito citopático na monocamada. Na PCR as amostras de sêmen foram negativas para N. caninum e para T. gondii. Nas amostras isoladas do cultivo celular, uma (6,7%) foi positiva para T. gondii com os primers TOX4 e TOX5, três (20%) foram positivas para T. gondii com os primers ITS2 e ITS5 e todas foram negativas para N. caninum. Os resultados comprovam que o T. gondii é eliminado viável no sêmen de touros naturalmente infectados.