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Título
IDENTIFICAÇÃO DE ACETOGENINAS DIRETAMENTE EM EXTRATOS E FRAÇÕES DE ANNONA RUGULOSA ATRAVÉS DE LC-ESI-MSN

Aluno: Luiz Eduardo da Silva - PIBIC/Fundação Araucária - Curso de Farmácia (MT) - Orientador: Francinete Ramos Campos - Departamento de Farmácia - Área de conhecimento: 10601058 - Palavras-chave: annona rugulosa; acetogeninas; lc-esi(+)-msn - Colaborador: Andersson Barison, Roberto Pontarolo.

As acetogeninas fazem parte de uma classe singular de metabólitos secundários encontrados em plantas da família Annonaceae. Nos últimos trinta anos, diversos estudos foram conduzidos visando o isolamento e identificação dessa classe de produtos naturais, principalmente pelo amplo espectro de atividades biológicas, como a ação citotóxica, antitumoral e pesticida. A espécie Annona rugulosa é uma árvore de 12 m de altura e 40 cm de diâmetro, encontrada no Sul e Sudeste do Brasil na Mata Atlântica. É conhecida popularmente como “araticum” e “anona”. Na medicina popular, o chá feito a partir das folhas é utilizado contra infecções dos rins e dores de garganta. Em virtude dessa relevância, o isolamento e identificação de acetogeninas tornam-se essencial, visto que não há estudos desses compostos em A. rugulosa descritos na literatura até o momento. Para isso, análises de frações brutas de folhas de A. rugulosa por ESI(+)-MSn e LC-MS/MS foram realizadas. As amostras foram dissolvidas em metanol/água (50:50 v/v) contendo ácido fórmico a 0,1% e injetadas em espectrômetro de massas do tipo triplo quadrupolo da Applied Biosystems MDS Sciex API 3200. Inicialmente, uma subfração purificada e analisada por RMN de 13C resultou na identificação das acetogeninas bis-THF adjacentes (di-hidroxiladas): isodesacetiluvaricina, desacetiluvaricina e membranacina. Esta foi utilizada como padrão para a otimização dos parâmetros de voltagens da fonte de ionização através da injeção direta por ESI(+)-MSn. Essas acetogeninas também foram identificadas na fração bruta alcaloídica por LC-ESI(+)-MSn, através da observação de duas sucessivas perdas de água, mostrando um perfil de fragmentação comum ao grupo das acetogeninas di-hidroxiladas. Por outro lado, o monitoramento da transição específica dos íons de m/z 645 a 533 através do experimento de monitoramento de íon selecionado (SIM) para a fração bruta neutra revelou a presença das seguintes acetogeninas bis-THF adjacentes (tri-hidroxiladas / com OH em C-4): bulatacina, asimicina e trilobacina. A perda de 112 Da para esse segundo grupo é considerada diagnóstica, como descrito previamente na literatura. Todas as acetogeninas estão sendo reportadas pela primeira vez em A. rugulosa.As análises por LC-ESI(+)-MSn, bem como os perfis de fragmentação, têm auxiliado na identificação de novas acetogeninas diretamente em misturas complexas reduzindo os custos e o tempo em futuras análises.