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Título
MELHORAMENTO DA PRODUÇÃO E ESTABILIDADE DA ENZIMA LACASE E APLICAÇÃO EM EFLUENTES DA INDÚSTRIA TÊXTIL E PRÉ-TRATAMENTO DE MATERIAL LIGNOCELULÓSICO

Aluno: Rafaella Storrer Mendes dos Santos - PIBIC/Fundação Araucária - Curso de Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia (MT) - Orientador: Adenise Lorenci Woiciechowski - Departamento de Engenharia Química - Área de conhecimento: 30601010 - Palavras-chave: lacase; substâncias indutoras; material lignocelulósico - Coorientador: Carlos Ricardo Soccol - Colaborador: Luiza Régnier Chemim Guimarães.

A enzima lacase (benzenodiol: oxigênio oxidoredutase, EC 1.10.3.2) pertence ao grupo das oxidases azuis e é o maior subgrupo das multicobre oxidases. Esta enzima possui grande capacidade em oxidar compostos aromáticos e apresenta uma vasta gama de substratos sobre os quais ela pode atuar, justificando sua aplicação em muitos setores industriais. A otimização do meio e das condições de cultura têm sido uma abordagem muito utilizada para a melhoria da produção, também a aplicação de metodologias estatísticas é útil para se elucidar os efeitos e as inter-relações entre os fatores fisiológicos. Apesar da baixa produção de lacases por basiodemicetos, esta pode ser consideravelmente aumentada pela presença de substâncias indutoras, principalmente compostos aromáticos ou fenólicos, com estruturas semelhantes à estrutura da lignina. O objetivo deste projeto consiste na produção e na otimização da produção da enzima lacase por cepas de Pleurotus sp. (PL031), realizando fermentação submersa, conduzida em frascos Erlenmeyer de 250 mL, mantidos em shaker ao longo de 14 dias sob temperatura controlada (30ºC), e agitação de 120 rpm. Como as lacases catalisam reações cujos substratos possuem compostos fenólicos, foram utilizados folhas e galhos de Araucaria sp. moídos (FGAM) e palma moída (Elaeis guineensis) como indutores enzimáticos, os quais apresentam compostos com grupos fenólicos, aumentando a produção da lacase em mais de dez vezes. Para a fermentação submersa foram testados meios de cultivo líquido com diferentes concentrações dos reagentes e dos indutores enzimáticos para avaliar qual irá apresentar melhor produção da enzima de interesse. Para isto, inicialmente foi realizado um primeiro experimento comparando-se a atividade de lacases em fermentação contendo diferentes quantidades de FGAM e dos outros componentes. A medição da atividade das lacases foi realizada através do monitoramento da oxidação de 500 µM ABTS (2,20-azino-bis- [3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonicacid], SIGMA) no comprimento de onda de 420 nm e o máximo valor obtido foi equivalente a 89,74483 U/mL, correspondente ao meio de cultivo com a máxima quantidade de FGAM (0,75g) testada.