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Título
SEPARAÇÃO E RECUPERAÇÃO DE FOSFATASE PRODUZIDA POR UM NOVO ORGANISMO FOTOSSINTÉTICO

Aluno: Elisiane Kuss Lourenço - PIBIC-AF/FA - Curso de Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia (MT) - Orientador: Michele Rigon Spier - Departamento de Engenharia Química - Área de conhecimento: 30601010 - Palavras-chave: microalgas; fosfatase; purificação parcial - Coorientador: Carlos Ricardo Soccol - Colaborador: Denise Naomi Xavier Salmon.

Com o passar dos anos a importância da biotecnologia esta crescendo e seu uso torna-se cada vez mais importante quando atentamos ao fato de que as fontes fósseis de energia são finitas e não renováveis. No âmbito da biotecnologia as microalgas são um potencial campo de estudos, haja vista estarem presentes em ambientes diversos, consequentemente possuindo filogenias distintas; o que lhes confere a capacidade de síntese de inúmeros metabólitos. Dentre os metabólitos, existem as fosfatases, enzimas que proporcionam a clivagem de fósforo inorgânico de sua forma orgânica. A síntese de um bioproduto exige a purificação do mesmo em função das suas aplicações. O objetivo do trabalho foi purificar enzimas - com síntese evidenciada em estudos anteriores - do grupo das fosfatases produzidas previamente por cultivo de um novo microrganismo fotossintético. Realizou-se um cultivo desta linhagem em meio de cultivo específico para a produção da enzima, com a concentração de indutor de 0,5% p/v (padronizada em estudos anteriores). A solução contendo a enzima foi então submetida a etapas de micro e ultrafiltrações, em membranas de 100, 50 e 3 KDa, sendo que o permeado da membrana de 100 KDa uma maior atividade, chegando a 15,9 U com 100% de recuperação. Foi possível então conduzir esta fração a uma etapa de purificação utilizando a cromatografia de exclusão molecular em FPLC (Fast Protein Liquid Cromatography) em coluna Sephacryl S-100 (6/60) (GE, Suécia), separando cinco pools de proteínas da amostra. Foi possível a produção de enzimas com atividade fosfatásica, a caracterização da faixa de tamanho molecular e a purificação parcial do produto, viabilizando-o para estudos para uma possível aplicação futura. Além disso, será possível a partir do estudo a identificação a nível molecular da enzima estudada.