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Título
CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR E CAPACIDADE DE COLONIZAÇÃO DE MILHO POR ESTIRPES DO GÊNERO HERBASPIRILLUM

Aluno: Valéria Mendes Soares - PIBIC/CNPq - Curso de Biomedicina (MT) - Orientador: Leonardo Magalhães Cruz - Departamento de Bioquímica - Área de conhecimento: 20800002 - Palavras-chave: herbaspirillum; maldi-tof; associação com planta - Colaborador: Vanessa Kessler Chicora, Gracieli Ferrari.

O gênero Herbaspirillum foi inicialmente descrito e conhecido por bactérias diazotróficas capazes de assimilar nitrogênio atmosférico através de um processo denominado Fixação Biológica de Nitrogênio e por estarem associadas a diversos grupos de plantas, principalmente gramíneas, promovendo seu crescimento. Atualmente o gênero Herbaspirillum possui 14 espécies descritas, isoladas de diferentes ambientes (endofítico, rizosfera, água e solo) e localizações geográficas (Brasil, Europa, Coreia, Japão e Ilhas Canárias), apresentando capacidade metabólica variável. Este trabalho buscou analisar por espectrometria de massa MALDI-TOF diferentes estirpes de Herbaspirillum crescidas em diferentes meios de cultura e avaliar a capacidade de colonização de plantas de milho por H. huttiense e H. seropedicae. Para a espectrometria de massa as bactérias foram crescidas em duplicata nos meios sólidos JNFb, NA, BDA e DYGS. Uma colônia isolada de cada placa foi preparada e analisada em triplicata em espectrômetro de massa MALDI-TOF. Para os testes de colonização, sementes de milho esterilizadas foram inoculadas por 15 minutos com 108 unidades formadoras de colônias. Os ensaios de avaliação da colonização superficial e interna das raízes foram realizados no 1°, 3° e 8° dia após a inoculação. O dendograma gerado a partir dos espectros de massa das estirpes mostrou um agrupamento dos espectros de acordo com o meio de cultura utilizado, além da diferenciação das espécies. Os resultados dos ensaios de colonização mostraram que a espécie H. huttiense é capaz de colonizar raízes de milho em níveis iguais aos encontrados para H. seropedicae. Assim, a espectrometria de massa e mostra como uma técnica rápida e confiável de identificação de espécies do gênero Herbaspirillum. Pela primeira vez, foi demonstrada a capacidade da espécie H. huttiense, isolada de água destilada na Nova Zelândia, de colonizar epifítica e endofíticamente plantas de milho, em iguais níveis a H. seropedicae, uma conhecida espécie promotora do crescimento vegetal.