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Título
CARACTERIZAÇÃO DOS POLISSACARÍDEOS DA MICROALGA MARINHA CHAETOCEROS MUELLERI E SUA CAPACIDADE DE LIGAÇÃO A BACTÉRIA SALMONELLA ENTERICA SV. THYPHIMURIUM)

Aluno: Mateus Soster Moriggi - PIBIC/CNPq-Balcão - Curso de Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia (MT) - Orientador: Miguel Daniel Noseda - Departamento de Bioquímica - Área de conhecimento: 20801009 - Palavras-chave: microalgas; polissacarídeos; capacidade de ligação - Coorientador: Maria Eugenia Duarte Noseda; Tatiane Winkler Marques Machado - Colaborador: Jenifer Mota Rodrigues.

As microalgas são organismos unicelulares que produzem uma grande variedade de estruturas químicas que são amplamente utilizadas em pesquisas biotecnológicas, entre eles polissacarídeos. Muitas atividades biológicas são descritas para polissacarídeos, dentre os estudos mais recentes, atividade de ligação a enterobactérias, vem sendo relatada como uma alternativa no controle de infecções entéricas como a salmonelose, principalmente em suínos, aves e bovinos por serem responsáveis por grande parte dos surtos alimentares. O objetivo do presente projeto é extrair e caracterizar os polissacarídeos obtidos da microalga Chaetoceros Muelleri (divisão Ochrophyta, classe Bacillariophyceae) e testá-los com relação à capacidade de ligação a bactéria Salmonella enterica sv. Thyphimurium. Inicialmente a microalga foi cultivada em meio Guillard f/2, a biomassa foi separada por meio de centrifugação e liofilizada. A biomassa seca foi submetida a extração sequencial, duas vezes em água 2% m/v (80°C por duas horas com agitação magnética) seguidas de centrifugação, o sobrenadante foi precipitado com etanol 3V, centrifugado ,dialisado e liofilizado, rendendo as frações AQ (2,5% rendimento) e AQ-SE (sobrenadante etanólico - 2,7% rendimento). A biomassa residual foi submetida à extração alcalina 0,5M (80°C por duas horas com agitação magnética e adição de 5% p/p de NaBH4) seguida de centrifugação, o sobrenadante foi neutralizado com HCl 0,5M, precipitado com etanol 3V, centrifugado, dialisado e liofilizado, rendendo as frações AL (2,5% rendimento) e AL-SE (4,3% rendimento - sobrenadante etanólico). As frações foram caracterizadas quimicamente quanto ao seu teor de carboidratos totais (DUBOIS,1956 ) e proteínas (LOWRY,1922 ). Os teores de carboidratos variaram de 30 a 50% nas frações extraídas com água e foram menores que 5% nas frações alcalinas. O teor de proteína foi alto em todas as frações variando de 20 a 50%. Análise da composição monossacarídica das frações revelou que as frações aquosas são majoritariamente compostas por glucose, indicando a presença de glucanas, enquanto as frações alcalinas mostraram-se heterogêneas quanto a esta composição. Análises de RMN 13C da fração AQ-SE mostrou seis sinais principais na região de carboidratos, sendo em 102,5 C-1, em 61,0 ppm C-6 livre, em 84,8 ppm sinal de ligação de C-3, e de 60 a 80 ppm os sinais de carbonos do anel. Indicando que se trata de uma glucana-?-(1?3)-ligada. As frações alcalinas apresentaram apenas sinais nas regiões de proteínas. Os testes de atividade biológica estão em andamento.