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Título
REGULAÇÃO DA ATIVIDADE DE PROTEÍNAS PII DE HERBASPIRILLUM SEROPEDICAE POR DESURIDILILAÇÃO CATALISADA POR GLND

Aluno: Lucca Pietro Camillo dos Santos - PIBIC/CNPq - Curso de Biomedicina (MT) - Orientador: Fabio de Oliveira Pedrosa - Departamento de Bioquímica - Área de conhecimento: 20804008 - Palavras-chave: herbaspirillum seropedicae; proteínas pii; glnd - Coorientador: Marco Aurelio Schuler de Oliveira - Colaborador: Rose Adele Monteiro, Emanuel Maltempi de Souza.

Herbaspirillum seropedicae é uma bactéria diazotrófica endofítica, membro da classe ? das proteobactérias, capaz de colonizar tecidos internos de plantas com interesse comercial, como arroz, trigo e cana de açúcar. H. seropedicae é capaz de estimular o crescimento da planta hospedeira, o que lhe confere grande potencial como biofertilizante. O metabolismo de nitrogênio de proteobactérias é regulado pelo sistema Ntr (nitrogen regulatory system). Dentre as proteínas que fazem parte desse sistema, as proteínas PII exercem um papel central, modulando a atividade de proteínas alvo por interação proteína-proteína. H. seropedicae possui duas proteínas PII, GlnB e GlnK. A atividade desta classe de proteínas pode ser regulada em dois níveis: tanto por modificação pós-traducional (uridililação/desuridililação) quanto por ligação de efetores alostéricos (ATP, ADP e 2-OG). Tanto a uridililação quanto a desuridililação são catalisadas pela proteína GlnD, uma enzima bifuncional. Entretanto, os mecanismos envolvidos na regulação da atividade de GlnD ainda não estão completamente esclarecidos. O objetivo do presente projeto é verificar a regulação da desuridililação de GlnK-UMP3pela enzima GlnD em diferentes condições. A desuridililação de GlnK-UMP3 é analisada por meio de eletroforese não desnaturante em gel de poliacrilamida. Os resultados indicaram que o efetor alostérico glutamina estimula a reação de desuridililação, enquanto 2-oxoglutarato (2-OG) parece se contrapor a esse efeito. Os dados permitem a proposta de um modelo no qual GlnD sensoria o aumento nos níveis de amônio via concentração de glutamina, que leva à desuridililaçãode PII, e a diminuição nos níveis de amônio via concentração de 2-OG, que estimula a uridililação de PII, permitindo a modulação do metabolismo celular.