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Título
CARACTERIZAÇÃO DE UMA ESTIRPE MUTANTE DE HERBASPIRILLUM RUBRISUBALBICANS NO GENE HROP4 QUE CODIFICA PARA A PROTEÍNA HROP4

Aluno: Henrique Petry Feiler - PIBIC/CNPq - Curso de Agronomia (MT) - Orientador: Rose Adele Monteiro - Departamento de Bioquímica - Área de conhecimento: 20804008 - Palavras-chave: herbaspirillum rubrisubalbicans; sst3; avrpto - Coorientador: Adriano Stefanello - Colaborador: Emanuel Maltempi de Souza, Maria Augusta Schmidt.

Herbaspirillum rubrisubalbicans é uma bactéria diazotrófica e endofítica, encontrada em uma associação geralmente não patogênica com diversas espécies de gramíneas. No entanto, a associação desta bactéria com cana-de-açúcar B4362 pode causar a doença da estria mosqueada. Estirpes mutantes de H. rubrisubalbicans nos genes do sistema de secreção do tipo III (SST3) não foram capazes de desencadear esta doença, indicando que este sistema é essencial para o desenvolvimento da doença. O SST3 secreta proteínas efetoras que podem estar envolvidas com o surgimento da doença da estria mosqueada. O sequenciamento do genoma mostrou que o H. rubrisubalbicans M1 possui 10 genes que possivelmente codificam para proteínas efetoras do SST3. Um desses genes codifica para uma proteína que apresenta 31% de identidade e 45% de homologia com o efetor do SST3 XopF1 de Xanthomonas oryzae pv. oryzae. Essa proteína de H. rubrisubalbicans foi chamada de HropF1. O gene hropF1 foi amplificado, clonado e mutagenizado através da inserção de um cassete que confere resistência a canamicina. O plasmídeo construído foi utilizado para a obtenção da estirpe mutante de H. rubrisubalbicans no gene hropF1. As estirpes mutantes isoladas serão confirmadas por PCR. Após a confirmação a estirpe mutante será utilizada em ensaios de inoculação em cana de açúcar 4362, milho e Vigna unguiculata.