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Título
COMPARAÇÃO DAS ATIVIDADES ANTICOAGULANTE E ANTITROMBÓTICA DE FRAÇÕES DE HEPARINAS SUÍNA E BOVINA

Aluno: Daiana Leila Drehmer - PROBEM/UFPR - Curso de Biomedicina (MT) - Orientador: Thales Ricardo Cipriani - Departamento de Bioquímica - Área de conhecimento: 20801033 - Palavras-chave: heparina; atividade anticoagulante; atividade antitrombótica - Colaborador: Alexsandro Vinícius Nogueira, Ana Helena Pereira Gracher.

A heparina tem ampla utilização clínica na prevenção e tratamento de problemas tromboembolíticos, atuando como um potente anticoagulante. Sua aplicação, entretanto, leva a efeitos colaterais, que são reduzidos com o fracionamento. Heparinas não fracionadas (1 g), bovina (UB) e suína (US), cedidas pela empresa Extrasul - Extracting Quality, foram solubilizadas em 10 mL água destilada e tratadas com 7,5 mL de etanol saturado com acetato de sódio. Este tratamento levou à formação de duas frações para cada tipo de heparina: sobrenadante (SS para suína e SB para bovina) e precipitado (PS e PB), com rendimentos de aproximadamente 90% para as frações precipitadas e 10% para as sobrenadantes em ambas as amostras. A massa molecular média (Mn) das amostras foi determinada por análise de ressonância magnética nuclear (RMN), a partir de uma adaptação do método de Desai e Linhardt (1995). O tempo de tromboplastina parcial ativada (aPTT) foi utilizado para determinar a potência das heparinas em unidades internacionais por miligrama (UI/mg). As heparinas de baixa massa molecular (SS e SB) apresentaram atividade anticoagulante menor que as respectivas heparinas não fracionadas (US e UB), enquanto que as heparinas de alta massa molecular (PS e PB) apresentaram atividade anticoagulante superior. Foram testados os efeitos das heparinas sobre a atividade da a-trombina e do fator Xa nas combinações trombina+AT (T1), trombina+HCII (T2) e fator Xa+AT (T3). Todas as frações testadas inibiram as enzimas em T1, T2 e T3. Para T1, as heparinas suínas e bovinas apresentaram resultados estatisticamente semelhantes. Em T2, as frações precipitadas diferiram das sobrenadantes, apresentando um IC50 menor, tanto em heparinas suínas como bovinas. Para T3, foi observada diferença estatística apenas entre os resultados obtidos com as heparinas PB e SB, com PB apresentando um menor IC50. Também foram realizados testes in vivo de inibição de trombose venosa em ratos, para avaliar a atividade antitrombótica, e testes de aPTT ex vivo após injeção subcutânea das amostras nos animais. As amostras apresentaram efeitos distintos na inibição da trombose venosa e as frações sobrenadantes mostraram efeito anticoagulante quando administradas por via subcutânea, possuindo uma possível aplicação clínica. Desse modo, observa-se que o fracionamento das heparinas adotado neste trabalho gera frações com diferentes potências de efeito anticoagulante e antitrombótico e com comportamentos distintos em relação à inibição enzimática da cascata da coagulação.