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Título
OXIDAÇÃO DA 2'-DESOXIGUANOSINA E DA GLUTATIONA

Aluno: Andressa Valerio - PIBIC/CNPq - Curso de Farmácia (MT) - Orientador: Glaucia Regina Martinez - Departamento de Bioquímica - Área de conhecimento: 20800002 - Palavras-chave: espécies reativas de oxigênio; oxidação da dguo; glutationa - Coorientador: Patrícia da Silva Peres.

A 2'-desoxiguanosina (dGuo) é o nucleosídeo púrico mais suscetível à ação de espécies reativas de oxigênio (ROS) e seus produtos de oxidação podem ser utilizados como biomarcadores para quantificar danos provenientes do estresse oxidativo. Um produto de grande interesse para estudo é a 8-oxo-7,8-dihidro-2'-desoxiguanosina (8-oxodGuo), que é comercialmente disponível, porém, de alto custo. Sendo assim, sua síntese é necessária para realização de estudos que envolvam a utilização de quantidades maiores dessa substância ou para produzir padrões isotópicos com rendimento melhor. A glutationa é um importante antioxidante endógeno. Os objetivos do trabalho foram investigar a formação de novos produtos de oxidação da dGuo, otimizar a reação de síntese da 8-oxodGuo e avaliar o consumo de GSH e a formação de sua forma oxidada (GSSG) por oxigênio singlete (1O2) gerado por DHPNO2. Para realização da oxidação da dGuo foram usados quatro tipos diferentes de reações. As reações testadas para oxidação da dGuo tiveram por base os reagentes de Fenton, em que os reagentes da reação I foram dGuo, EDTA, Fe2+, ácido ascórbico e O2e da reação II foram dGuo, EDTA, Fe2+, ácido ascórbicoe H2O2. Nas últimas reações o íon metálico foi mudado para Cu2+. A reação III foi constituída por dGuo, EDTA, Cu2+, ácido ascórbico e O2 e a reação IV por dGuo, EDTA, Cu2+, ácido ascórbico e H2O2. Já para a síntese da 8-oxodGuo foi utilizada a reação com dGuo, EDTA, Cu2+, ácido ascórbico e H2O2 e estas condições variando suas concentrações e incluindo modificações de tempo e pH a fim de observar o melhor rendimento de produto. O consumo de GSH e a formação de GSSG foram analisados por cromatografia líquida de alta performance (HPLC). A detecção das reações e da síntese da 8-oxodGuo foi realizada por HPLC seguida de espectrometria de massas. Um dos produtos formados foi a 8-oxodGuo, que é um produto bastante conhecido, além de outros produtos que ainda precisam ser melhor caracterizados. A GSH foi totalmente consumida com a concomitante geração da sua forma dissulfeto. Contudo, o conteúdo encontrado de GSSG após a oxidação resultou em cerca de 40% do total da GSH colocada anteriormente em solução com o 1O2. Este resultado sugere que o 1O2 possa também estar oxidando a GSH a outras formas que não apenas GSSG, tais como aos ácidos sulfênico, sulfínico e sulfônico. A confirmação desta hipótese, assim como a quantificação destes produtos, deverá ser um objetivo posterior.