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Título
IDENTIFICAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO ESTRUTURAL DE POSSÍVEIS ALVOS DE CPS E AGS NA CASCATA DE COAGULAÇÃO

Aluno: Aline Guimarães Santana - PROBEM/UFPR - Curso de Biomedicina (MT) - Orientador: Thales Ricardo Cipriani - Departamento de Bioquímica - Área de conhecimento: 20801009 - Palavras-chave: arabinogalactana e pectina cítrica sulfatadas; atividade anticoagulante; interação proteína-ligante - Coorientador: Ana Helena Pereira Gracher e Tatiana de Arruda Campos Brasil deSouza.

Doenças relacionadas ao sistema circulatório causam uma alta taxa de mortalidade, sendo que, quando não levam a vítima a óbito, frequentemente causam algum grau de invalidez, gerando graves consequências tanto ao paciente e famíliares, quanto ao âmbito sócio-econômico. Na atualidade, a heparina (polissacarídeo de origem animal altamente sulfatado) é o medicamento mais utilizado para o tratamento desses tipos de distúrbios, entretanto, apesar de sua eficiente atividade anticoagulante e antitrombótica, pode apresentar graves efeitos colaterais em função do seu baixo índice terapêutico e interações inespecíficas. Em decorrência desse fato, observou-se a necessidade da busca de novos agentes terapêuticos como alternativa à heparina, que apresentem não somente a atividade anticoagulante, mas também uma ação seletiva, a fim de facilitar o controle da ação farmacológica no organismo do paciente. Esse trabalho tem como objetivo compreender o mecanismo anticoagulante, a nível molecular, de uma pectina cítrica extraída de mesocarpo de Citrus sinensis (laranja) (CPS) e uma arabinogalactana extraída de farelo de soja (AGS), ambas quimicamente sulfatadas. A escolha dos polissacarídeos CPS e AGS foi baseada em sua eficiente atividade anticoagulante (investigada em trabalhos anteriores), facilidade e baixo custo de obtenção. Proteínas da cascata de coagulação serão obtidas por cromatografia de afinidade em coluna de heparina, cromatografia de exclusão molecular e troca iônica a partir do plasma e do soro humano de doadores voluntários. As proteínas presentes nas frações serão determinadas por espectrometria de massas e estas frações serão incubadas com concentração a ser determinada de AGS e CPS. A interação dos complexos proteína-ligante e/ou proteínas-ligante formados serão analisados por técnicas de biofísica molecular como, DLS, CD, SEC analítica e thermal shift. A identificação de suas proteínas alvos na cascata de coagulação e caracterização estrutural desses complexos, são importantes para a compreensão do funcionamento desses compostos na hemostasia, facilitando o controle de sua atividade in vivo, além de servir para geração de dados preliminares, facilitando possíveis estudos que visem propor alterações químicas direcionadas nesses compostos afim de aumentar sua especificidade e eficiência.