Aluno de Iniciação Científica: Everton Geraldo Capote Ferreira (PIBIC/UFPR-TN)
Curso: Tecnologia em Biotecnologia - Palotina
Orientador: Luciana Grange
Co-Orientador: Marco Antonio Bacellar Barreiros
Colaborador: Jean Fausto de Carvalho Paulino, Walkyria Neiverth, André Barazetti
Departamento: Campus Palotina
Setor: Campus Palotina
Palavras-chave: endofíticos , diversidade , REP-PCR
Área de Conhecimento: 21202001 - MICROBIOLOGIA APLICADA

As rizobactérias endofíticas possibilitam redução nos impactos ambientais e nos custos de produção na agricultura, devido aos seus potenciais biotecnológicos para a fixação biológica de nitrogênio (FBN) e utilização como promotoras de crescimento vegetal (BPCV). Sendo assim, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a diversidade genética de indivíduos endofíticos isolados de distintos solos provenientes de 9 manejos agrícolas diferentes entre si, mais uma área de mata ciliar, através de técnicas moleculares. O DNA genômico das estirpes foi extraído de colônias puras, obtendo-se um total de 323 amostras. Após isto, houve a diluição das mesmas, a fim de alcançar concentrações ideais e uniformes. Posteriormente as amostras foram quantificadas via espectrofotômetro para analisar o grau de pureza. Para a verificação da concentração e pureza, os DNAs foram corridos em gel de agarose 1,5%. Escolheu-se 269 estirpes isoladas para a caracterização genética e esta foi realizada pela reação de rep-PCR (Repetitive Element Polymorphism) com "primer" específico BOX e os perfis polimórficos apresentados foram analisados e agrupados com auxílio do programa BioNumerics. Também foram realizados cálculos quanto aos índices de diversidade e riqueza genética a partir do programa SPADE. Obteve-se um total de 25 agrupamentos com mais 16 bactérias consideradas perfis isolados quando comparados a 60% de similaridade, não havendo nenhum grupo que apresentou todos os perfis a partir de um único tipo de manejo ou classe de solo. Dentre os grandes grupos (GG), o GG17 foi o que apresentou maior número de perfis (70) com isolados advindos de todos os tipos de manejo e classe de solos, destacando entre estes, o manejo correspondente à mata ciliar, pois este contribuiu com o maior número de perfis (16). Quanto aos índices de diversidade, riqueza e grupos esperados em coleta futura, estes apontaram o manejo com monocultivo de cana-de-açúcar e alto teor de fósforo (P) aplicado sob a forma de vinhaça, como sendo o mais favorável à diversidade. Contudo, quanto a maior riqueza e grupos esperados em coleta futura, o destaque foi para o manejo com sucessão milho-soja em plantio convencional e a menor média quanto a estes índices foi observada para o manejo com sucessão milho-soja orgânico sobre plantio direto. Portanto, a tipagem genética por BOX-PCR das estirpes isoladas neste trabalho permitiu verificar uma alta diversidade em todas as regiões avaliadas demonstrando que a classe de solo, manejo e tipo de vegetação influenciaram na dominância de determinados grupos genéticos.

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