AVALIAÇÃO DE DNA TOTAL NO SISTEMA IMUNOLÓGICO DE AVES DE CORTE

Aluno de Iniciação Científica: Carolina Haluche Lautert (PIBIC/Fundação Araucária)
Curso: Medicina Veterinária - Curitiba
Orientador: Luiz Felipe Caron
Co-Orientador: Tobias Fernandes Filho
Colaborador: Breno Castello Branco, Celso Fávaro Junior, Max Ingberman
Departamento: Patologia Básica
Setor: Ciências Biológicas
Palavras-chave: avicultura , DNA bacteriano total , resposta imune
Área de Conhecimento: 21100004 - IMUNOLOGIA

As aves utilizadas para a produção comercial passaram por um largo processo de seleção genética objetivando aumentar a capacidade produtiva. Porém, esses animais são debilitados imunologicamente, uma vez que as características produtivas e imunológicas competem entre si pela alocação dos recursos metabólicos. Paralelo a isso, sistemas intensivos de produção, caracterizados por adensamento populacional, causam um estado de estresse crônico, sendo deletério ao sistema imune gerando perdas econômicas significativas. Partindo deste pressuposto, torna-se desejável investir em estratégias que modulem a resposta imune. Há indícios de que o DNA bacteriano possa estimular o sistema imune, como já descrito em galinhas e humanos, uma vez que nele prevalecem sequências CpG não metiladas, diferentemente dos vertebrados, que apresentam sequências CpG metiladas. O CpG bacteriano é reconhecido como não-próprio por organismos superiores e assim, atua como imunomodulador. Essas seqüências são consideradas padrões moleculares associados a patógenos (PAMPs). O PAMP CpG é reconhecido por receptores da família Toll-like (TLR) que são constitutivamente expressos por subconjuntos de células imunes. A ativação desses receptores desencadeia uma resposta imune inata e a produção de citocinas. O CpG bacteriano pode se ligar e ativar diferentes tipos de células, incluindo macrófagos, células dendríticas e mastócitos. Nesse contexto, o presente estudo visa verificar os efeitos do DNA bacteriano total no sistema imune de aves de corte, testando sua funcionalidade como molécula imunoestimulante. A técnica eleita para a avaliação do perfil imune de 84 aves (Gallus gallus domesticus) foi a citometria de fluxo. Do total das aves, 21 pertencerão ao grupo controle e 63 ao grupo que receberá aplicação de DNA total. O grupo experimental será subdividido em 3 subgrupos de 21 aves. Cada subgrupo receberá respectivamente 5, 25 e 50µg de DNA. Durante o período de teste, o sangue periférico das aves será coletado e submetido à citometria de fluxo para avaliação dos parâmetros CD4, CD8, CD28, linfócito B, macrófagos, TCRvß1 e MHCII. O DNA total bacteriano foi extraído no Laboratório de microbiologia Yasuyoshi Hayashi da UFPR a partir de Escherichia coli DH5a não patogênica, seguindo-se o protocolo modificado de Raeder & Broda (1985). A integridade e a concentração do DNA extraído foram respectivamente avaliadas por perfil eletroforético em gel de agarose e espectrofotometria.

 

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