Aluno de Iniciação Científica: Elisiane Kuss Lourenço (PIBIC-AF/CNPq)
Curso: Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia
Orientador: Michele Rigon Spier
Co-Orientador: Carlos Ricardo Soccol, Julio Cesar de Carvalho
Colaborador: Eduardo Bittencourt Sydney, Vanessa Ghiggi, Denise Naomi Xavier Salmon
Departamento: Engenharia Química
Setor: Tecnologia
Palavras-chave: síntese , fosfatases , organismos fotossintéticos
Área de Conhecimento: 20805004 - ENZIMOLOGIA

Microalgas pertencem ao reino vegetal e filogeneticamente são compostas de espécies procarióticas ou eucarióticas. São caracterizadas pela presença de pigmentos, responsáveis por coloração variada e por mecanismo fotoautotrófico. Nos últimos anos, tem sido focado o aproveitamento do potencial biotecnológico desses organismos, principalmente devido à identificação de diversas substâncias capazes de serem sintetizadas. Enzimas são biocatalisadores de estrutura protéica, termolábeis e que aceleram a velocidade de uma determinada reação química. Fosfatases são enzimas que proporcionam a clivagem de fósforo inorgânico de sua forma orgânica. O objetivo do trabalho foi verificar a ocorrência de síntese de uma fosfatase pelas microalgas A e B, e estudar as variações físico-químicas para a otimização de sua produção. Realizou-se um cultivo da linhagem A com diferentes concentrações de substrato (indutor) adicionadas aos respectivos meios seletivos para a indução da síntese da enzima (1, 2, 10 e 15 vezes a quantidade equivalente a (PO2)4-) existente no meio cultivo sintético. Os cultivos foram mantidos em salas climatizadas, com luminosidade controlada (22,3 µM/m2s) e foram agitados de forma manual diariamente para haver a difusão de CO2. Alíquotas foram retiradas dos meios de cultivos, nos tempos de 0, 3, 5 e 6 dias de cultivo e centrifugadas (5.000 rpm/5 minutos). O sobrenadante foi utilizado para a determinação da atividade de fosfatases por método espectrofotométrico (Heinonen e Lathi, 1981, modificado por Spier et al., 2010). Os cultivos foram realizados em duplicata e as análises em triplicata. Estudos preliminares mostraram que a concentração de 10 vezes maior de substrato apresentou os resultados mais promissores para a produção da enzima pela microalga A, apresentando uma produção de 225 U/L no sexto dia de cultivo. Entretanto mais estudos serão realizados para possibilitar a confirmação da produção da fosfatase pesquisada pela linhagem A. Esse estudo esta sendo realizado com o microrganismo B, e os resultados serão apresentados ao fim da vigência deste projeto de pesquisa. Também serão conduzidos estudos de variações físico-químicas e variação nas concentrações de nutrientes indutores nos meios de cultivo, para estimular a síntese da enzima de interesse e ainda possivelmente afirmar acerca da produção da enzima e selecionar o microrganismo fotossintético mais promissor.

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