Aluno de Iniciação Científica: Samia Talise El Horr de Moraes (PIBIC/Fundação Araucária)
Curso: Medicina
Orientador: Geraldo Picheth
Co-Orientador: Henrique Ravanhol Frigeri
Colaborador: Izabella Castilhos Ribeiro dos Santos-Weiss, Petra Cristina van den Bogert, Karla Schoen
Departamento: Patologia Médica
Setor: Ciências da Saúde
Palavras-chave: -30G>A , glucoquinase , polimorfismo
Área de Conhecimento: 20804008 - BIOLOGIA MOLECULAR

O Diabetes mellitus (DM), em suas várias formas (tipo 1, tipo 2, e gestacional), afeta cerca de 10% da população mundial, sendo caracterizada por hiperglicemia resultante de um defeito na secreção da insulina, na ação da insulina ou em ambos. A glucoquinase (GCK) é uma enzima que atua como um sensor das células beta pancreáticas para a secreção de insulina estimulada pela glicose. Mutações no gene desta enzima afetam que afetam a atividade da GCK são responsáveis pelo diabetes monogênico designado MODY-2 (Maturity onset Diabetes of the Young, Type 2, diabetes da maturidade de aparecimento precoce). Mais de 600 polimorfismos neste gene estão descritos. Neste trabalho, foi avaliado o polimorfismo -30G>A (rs1799884) da região promotora do gene da GCK em pacientes com diabetes tipo 2, gestacional e em indivíduos saudáveis em estudo tipo caso-controle. O projeto tem aprovação do Comitê de Ética (CEP/SD:565.102.08.06; CAAE:0135.0.208.091-08). Amostras de 200 indivíduos saudáveis (gestantes, n=100 e não-gestantes, n=100), diabéticos tipo 2 (DM2, n=56) e gestacional (DMG, n=100) foram selecionado de acordo aos critérios da Associação Americana de Diabetes. O DNA foi extraído de sangue total por método de salting out e normalizado na concentração de 100 ng/µL. A genotipagem foi realizada por PCR-RFLP (fragmentos de tamanho de restrição) utilizando a enzima MwoI (NewEnglang BioLabs). Os fragmentos de restrição foram separados por eletroforese em gel de poliacrilamida a 10% em tampão TBE 1X. Os géis foram fotodocumentados em sistema BioChemi – UVP. Todos os genótipos analisados estão em equilíbrio de Hardy-Weinberg. As frequências (%) genotípicas (GG, GA e AA) e alélicas (alelo A, 95% intervalo de confiança) foram respectivamente: controle (64,5; 31,0; 4,5 e 20,5[15-26]), DM2 (66,1; 28,6; 5,3 e 19,6[12-27]) e DMG (57,2; 38,0; 4,8 e 24,0[19-30]). As comparações da frequências genotípicas e alélicas entre os tipos de diabetes em estudo e o grupo controle não mostraram diferença significativa (p< 0,05; teste exato de Fisher bidirecional). As gestantes diabéticas portadoras do alelo -30A apresentaram glicemia em jejum significativamente menor comparada com o grupo controle. O polimorfismo em estudo não apresentou relação com os componentes do perfil lipídico (colesterol total, HDL-colesterol, LDL-colesterol e triglicérides). Em síntese, o polimorfismo -30G>A da região promotora do gene da glucoquinase não esta associado aos tipos de diabetes em estudo, e o alelo -30A esta associado à maior concentração de glicose em jejum em gestantes com DMG.

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