CONSTRUÇÃO DE MUTANTES DE HERBASPIRILLUM RUBRISUBALBICANS NOS GENES FHAB E EPSB, POTENCIALMENTE ENVOLVIDOS COM O MECANISMO DE INTERAÇÃO PLANTA-BACTERIA
Aluno de Iniciação Científica: Thiago Borba Kokot (PIBIC/Fundação Araucária)
Curso: Farmácia
Orientador: Fábio de Oliveira Pedrosa
Co-Orientador: Rose Adele Monteiro
Colaborador: Eduardo Balsanelli, Emanuel Maltempi de Souza, Glaucio Valdameri
Departamento: Bioquímica
Setor: Ciências Biológicas
Palavras-chave: Herbaspirillum , phaB , epsB
Área de Conhecimento: 20802005 - BIOQUÍMICA DOS MICROORGANISMOS
A associação de Herbaspirillum com gramíneas inicia-se com a adesão da bactéria à superfície radicular, seguida de colonização dos pontos de emergência das raízes secundárias e penetração por descontinuidades da epiderme. Ocorre então rápida colonização e ocupação de espaços intercelulares da raiz, assim como do aerênquima, xilema e, finalmente, partes aéreas da planta. Herbaspirillum rubrisubalbicans é uma Betaproteobacteria fixadora de nitrogênio promotora de crescimento vegetal, sendo ainda capaz de causar a doença da estria mosqueada na variedade norte-americana B-4362 de cana-de-açúcar. Esta doença é caracterizada pelo desenvolvimento de estrias vermelhas com manchas brancas nas folhas, tem pouca importância econômica e afeta poucas variedades, não matando a planta, apenas diminuindo a área fotossintética, a vida útil da folha e sua produtividade. Os fatores moleculares envolvidos na associação de H. rubrisubalbicans com plantas não são conhecidos. Análises do genoma deste microrganismo revelaram a presença de genes de exopolissacarídeos, lipopolissacarídeos, sistemas de secreção de proteínas, adesinas e flagelo, descritos como fatores de colonização. O objetivo principal deste trabalho foi avaliar o envolvimento dos genes fhaB e epsB de H. rubrisubalbicans na biossíntese de adesinas e exopolissacarídeo, respectivamente, determinando suas funções na interação deste organismo com vegetais. As regiões genômicas de ambos os fatores foram estudadas e possibilitaram modelar uma via de biossíntese de EPS e a provável estrutura de um proteína FhaB. Os primers para construção da estirpe mutante no gene fhaB foram desenhados e os genes amplificados, mas as estirpes mutantes nos genes fhaB e epsB ainda não foram obtidas, impedindo a avaliação do papel desses genes na interação entre o H. rubrisubalbicans e a planta associada.