ANÁLISE MICROBIOLÓGICA E MOLECULAR DE BACTÉRIAS ASSOCIADAS A PLANTAS DE TRIGO CONTROLE E SUBMETIDAS A INOCULAÇÃO COM BACTÉRIAS DIAZOTRÓFICAS
Aluno de Iniciação Científica: Gracieli Ferrari (PIBIC/CNPq)
Curso: Ciências Biológicas
Orientador: Leonardo Magalhães Cruz
Colaborador: Maria Isabel Stets
Departamento: Bioquímica
Setor: Ciências Biológicas
Palavras-chave: Azospirillum brasilense , Trigo , MALDI-TOF
Área de Conhecimento: 20802005 - BIOQUÍMICA DOS MICROORGANISMOS
A fixação biológica de nitrogênio é o processo pelo qual este elemento químico é captado da atmosfera, onde se encontra na sua forma molecular relativamente inerte (N2), e é convertido em compostos nitrogenados (como amônio ou nitrato) usados em diversos processos químico-biológicos do solo, especialmente importantes para a nutrição de plantas. Azospirillum brasilense é uma bactéria promotora do crescimento vegetal, capaz de fixar nitrogênio, que se associa com diversas plantas de interesse agrícola e é recomendada como inoculante para as culturas do milho e trigo. O objetivo do trabalho foi determinar a diversidade bacteriana associada á cultura do trigo submetido a diferentes doses de nitrogênio, condições de cultivo e inoculação com a estirpe Ab-V5 de A. brasilense. Bactérias foram isoladas de raízes de trigo com cinco dias de crescimento e caracterizadas por espectrometria de massa MALDI-TOF usando um espectrômetro Autoflex (Bruker Daltonics) equipado com um laser de nitrogênio e o software Flex Control v. 3.0 (Bruker Daltonics). Para a análise e agrupamento dos espectros foi utilizado o programa Speclust (http://bioinfo.thep.lu.se/ speclust.html). Representantes para os grupos obtidos foram selecionados para posterior sequenciamento do gene 16S rRNA. As sequencias obtidas foram comparadas com o banco de dados GenBank (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/) visando à obtenção de uma identificação taxonômica. O número total de isolados em cada tratamento foi: Tratamento com inoculante e 50% de N, 28 isolados; Tratamento sem inoculante e 50% de N, 30 isolados; Controle sem inoculante e sem N, 26 isolados; Amostras do solo, 11 isolados. Como resultados parciais foram identificados os isolados: Pseudomonas sp., Bacillus sp., Pantoea ananatis, Arthrobacter creatinolyticus e Agrobacterium larrymoorei.