AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTICOAGULANTE E ANTITROMBÓTICA DE POLISSACARÍDEOS QUIMICAMENTE SULFATADOS

Aluno de Iniciação Científica: Nadiezda Coelho Maas (PIBIC/CNPq)
Curso: Farmácia
Orientador: Thales Ricardo Cipriani
Co-Orientador: Marcello Iacomini
Colaborador: Ana Helena Pereira Gracher, Guilherme Lanzi Sassaki, Philip Albert James Gorin
Departamento: Bioquímica
Setor: Ciências Biológicas
Palavras-chave: Anticoagulante , Antitrombótico , Polissacarídeos sulfatados
Área de Conhecimento: 20801009 - QUÍMICA DE MACROMOLÉCULAS

A heparina, um polissacarídeo linear altamente sulfatado, é o fármaco mais utilizado na prevenção e tratamento dos problemas tromboembolíticos. Ela atua como um anticoagulante, principalmente, por se ligar à antitrombina (AT) e ao cofator II da heparina (HCII), acelerando a taxa com que estes inibidores de proteases formam complexos com enzimas da coagulação, inativando-as. Contudo, o uso da heparina é limitado pelo alto risco de sangramento. Além disso, por ser obtida de tecidos suíno e bovino, a contaminação por patógenos animais é uma grande preocupação. Por estas razões, tentativas têm sido feitas para a obtenção de alternativas à heparina, incluindo diversos estudos com polissacarídeos naturalmente ou quimicamente sulfatados. A pectina cítrica (CP; Mw=120 kg/mol), um polissacarídeo composto por uma cadeia linear de [?4)-a-D-GalpA-(1?]n, foi submetida a um ou quatro ciclos de carboxi-redução, resultando nas amostras CP-CR1 e CP-CR4, com 40% e 2% de ácido galacturônico, respectivamente. Os polissacarídeos foram quimicamente sulfatados, originando CP-S (Mw=148 kg/mol), CP-CR1S (Mw=132 kg/mol) e CP-CR4S (Mw=91 kg/mol). De acordo com as massas moleculares, a carboxi-redução das unidades de ácido galacturônico torna o polissacarídeo mais suscetível à clivagem durante o processo de sulfatação. Os polissacarídeos sulfatados (CP-S, CP-CR1S e CP-CR4S) apresentaram diferentes atividades anticoagulantes, dobrando os valores de APTT em concentrações de 28,7, 13,2, e 4,9 µg/ml respectivamente. CP-CR1S e CP-CR4S também mostraram diferentes atividades antitrombóticas in vivo, com ED50 de 3,01 e 1,70 mg/kg, respectivamente. Como a heparina, CP-CR1S e CP-CR4S inibiram a trombina por um mecanismo dependente de AT e HCII. O potencial hemorrágico das amostras também foi similar ao da heparina.  De acordo com análises de metilação, 91,1% e 50,2% das posições 6-O- em CP-CR4S e CP-CR1S foram sulfatados, respectivamente. Portanto, a substituição dos grupamentos carboxila por sulfato nesses polissacarídeos aumenta os efeitos anticoagulante e antitrombótico, sem aumentar o efeito hemorrágico. O polissacarídeo CP-CR4S mostrou-se mais eficiente, sendo aparentemente um promissor agente anticoagulante e antitrombótico.

 

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