EFEITOS DO ANETOL SOBRE AS PROTEÍNAS CONTRÁTEIS DE MÚSCULO CARDÍACO
Aluno de Iniciação Científica: Paula Adamo de Almeida (PIBIC/Fundação Araucária)
Curso: Farmácia
Orientador: Carlos Estevam Nolf Damiani
Co-Orientador: Rosalvo Tadeu Fogaça
Colaborador: Robson Ruiz Olivoto, Ilana Kassouf Silba
Departamento: Fisiologia
Setor: Ciências Biológicas
Palavras-chave: Anetol; músculo cardíaco; contração muscular
Área de Conhecimento: 20702027 - FISIOLOGIA CARDIOVASCULAR
Avaliamos os efeitos do anetol sobre a mecânica cardíaca e seus mecanismos de ação. Utilizamos tanto a técnica de “fibra intacta” (trabéculas de papilares intactos submetidas a estímulos elétricos, 10 Hz) como a técnica de “fibra permeabilizada” (skinned fiber). Utilizamos ratos Wistar (250-300g). Após anestesia, papilares intactos foram dissecados, trabéculas foram isoladas, montadas e submetidas à estimulação elétrica. As soluções experimentais (pCa -log [Ca2+]) foram: Solução R (pCa 8,5), relaxante; Solução A (pCa 4,0), máxima força; acrescidas de 5 mM de EGTA. Os dados são expressos em mN/mm2. Estudos mostram que o aumento da tensão de repouso desenvolvida pelo anetol não estaria na dependência da liberação de Ca2+ pelo RS. Inferimos que esse efeito induzido pelo anetol poderia ser da própria função das pontes cruzadas. Em preparações com fibras intactas, após tratamento com BDM (30 mM), um composto que abole a contração muscular por diminuir o padrão de interação das pontes cruzadas, adicionamos anetol (0,7 mM). Os resultados mostraram que o aumento da tensão de repouso induzida pelo anetol foi abolido pelo BDM (0,064 ± 0,016 vs 2,145 ± 0,577; BDM vs Anetol; N=10). Outra possibilidade seria a de que o aumento da tensão de repouso induzida pelo anetol fosse por redução na concentração intracelular de ATP. Em músculo cardíaco, a redução de MgATP, a valores críticos, pode levar à formação tanto de não-ciclização (rigor, ATP-free) como de ciclização (ATP-ligação) das pontes cruzadas induzindo uma ativação cooperativa do filamento fino. Para avaliarmos os possíveis efeitos do anetol sobre a produção de ATP e ciclização das pontes cruzadas, as trabéculas foram permeabilizadas com Triton X-100 (1% vol/vol). Este é um detergente que solubiliza o sarcolema e todas as membranas subcelulares, possibilitando realizar a ativação do sistema contrátil com Ca2+ sob condições controladas. Assim, após tratamento das trabéculas com ATP (2 mM e 10 mM) adicionamos anetol (10 mM). Os resultados mostraram que nessas preparações, a tensão de repouso induzida pelo anetol foi revertida significativamente: (Anetol 10 mM + ATP 10 mM: 2,586 ± 0,337 vs Anetol 10 mM + ATP 2mM: 9,210 ± 0,883; N=5). Em conjunto, os resultados sugerem que a tensão de repouso induzida pelo anetol seria, possivelmente, através de um mecanismo independente de Ca2+ o qual, poderia envolver uma ativação cooperativa do filamento de actina de músculo cardíaco devido a uma possível forte ligação das pontes cruzadas (estado de rigor).