PROLIFERAÇÃO E MORTE CELULAR, IN VITRO, DE CÉLULAS DO TUMOR DE WALKER 256 NA PRESENÇA DE ÓLEO PEIXE BSA-COMPLEXADO E DE SORO OBTIDO DE RATOS COM TUMOR

Aluno de Iniciação Científica: ANNA JULIA PIETROBON (Pesquisa voluntária)
Curso: Ciências Biológicas
Orientador: LUIZ CLAUDIO FERNANDES
Colaborador: Adriana Aya Yamaguchi, Sandro José Ribeiro Bonatto, Katya Naliwaiko
Departamento: Fisiologia
Setor: Ciências Biológicas
Palavras-chave: Tumor de Walker , Óleo de Piexe , Proliferação
Área de Conhecimento: 20700008 - FISIOLOGIA

Óleo de peixe (OP), rico em ácidos graxos poliinsaturados n-3 (AGPI), tem capacidade imunomodulatória e antitumoral. Suplementação com OP durante 30 dias a ratos Wistar portadores de tumor de Walker 256 reduz o crescimento tumoral, mas os mecanismos pelos quais isso acontece ainda não estão completamente esclarecidos. Oro Inka (OI), também rico em AGPI n-3, em especial ácido a-linolênico (ALA), tem, in vivo, efeitos antitumorais semelhantes aos do OP. Porém, não se sabe se isto corre por ação direta ou se o ALA é alongado a ácidos graxos maiores. Neste estudo, investigamos a proliferação e morte das células ascíticas de tumor de Walker 256 in vitro, na presença de soro de ratos controle e com tumor, bem como com os óleos complexados à BSA. Ratos Wistar foram inoculados intraperitonealmente com células do tumor de Walker 256. Após sete dias, estes foram ortotanasiados e o fluído ascítico coletado. As células foram cultivadas a uma concentração de 105 células/mL em placas de 96 poços com meio de cultura RPMI-1640 enriquecido com SFB e antibióticos, 20 µL de solução (2-14C)-timidina e presença ou ausência de OP e OI complexados à BSA 2% nas proporções 1:5, 1:8, 1:10 e 1:20. Após 24h as células foram coletadas em coletor múltiplo. Outro experimento foi efetuado na presença de soro de ratos controle, ratos suplementados com OP ou OI e de portadores de tumor sem suplementação, em que as células ascíticas foram cultivadas na presença de soro diluído 1:5 e 1:10 por 48h e coletadas como anteriormente. O número de células foi estimado em contador Beckman LS 6500. A morte celular foi avaliada por citometria de fluxo usando anexina-V. Na presença de OP-BSA complexado nas proporções 1:5, 1:8, 1:10 e 1:20 a proliferação após 24h foi reduzida significativamente em cerca de 4 vezes, quando comparada aos controles (meio e BSA), enquanto que a presença de OI-BSA complexado não promoveu mesmo efeito. A proliferação na presença de soro de animais com tumor aumentou em 1,7 vezes. Quando o soro foi diluído à 1:10 esse efeito não foi observado. Na presença de soro obtido de animais sem tumor e de suplementados com OP ou OI, não foi observada alteração da proliferação comparada aos grupos meio e BSA. Um possível mecanismo pelo qual isto ocorreu foi devido a maior mortalidade das células provocadas pela presença do OP, que foi 3 vezes maior que a situação controle, o mesmo não sendo observado na presença de OI. Ainda, nossos dados sugerem que no soro de animais com tumor de Walker 256 há a presença de fator pró-proliferativo para as células tumorais.

 

0328