ANÁLISE ENZIMÁTICA DE IMATUROS DE CHIRONOMUS SANCTICAROLI (DIPTERA: CHIRONOMIDAE) EXPOSTOS A HIDROCARBONETO

Aluno de Iniciação Científica: Maiara Vicentini (PETROBRAS)
Curso: Ciências Biológicas
Orientador: Mario Antônio Navarro da Silva (UFPR) e Aderlene Inês de Lara (FUNPAR)
Colaborador: Gisele dos Santos Morais (mestranda), Msc. Débora Rebechi (doutoranda), Profa. Dra. Helena Cristina da Silva de Assis
Departamento: Zoologia
Setor: Ciências Biológicas
Palavras-chave: enzimas , fenantreno , Chironomidae
Área de Conhecimento: 20406002 - ZOOLOGIA APLICADA

Os quíronomídeos são insetos aquáticos da ordem Diptera que podem ser utilizados como bioindicadores ambientais, por apresentarem sensibilidade a poluentes. Dentre esses poluentes, pode ser citado o fenantreno, um hidrocarboneto policíclico aromático. No presente estudo, foram avaliados os efeitos da exposição de larvas de Chironomus sancticaroli Strixino & Strixino, 1981 (Diptera: Chironomidae) ao fenantreno, através de três biomarcadores bioquímicos: a acetilcolinesterase (AChE), a esterase alfa (EST-a) e a esterase beta (EST-ß). Os organismos utilizados nos bioensaios foram obtidos no Laboratório de Entomologia Médica e Veterinária, da colônia mantida em sala de criação sob condições controladas de temperatura (25 ± 2ºC), fotoperíodo (12h claro/12h escuro) e umidade (80 ± 10%). Os bioensaios agudos foram realizados em copos de vidro, com larvas de 3º ínstar inicial/4º ínstar final, com duração de 96h, utilizando um controle e quatro concentrações: a CENO (Concentração de Efeito Não Observável - 0,12 ppm), a CL10 (0,782 ppm), a CL 30 (1,012 ppm) e a CL50 (1,209 ppm). O bioensaio crônico foi realizado em aquário, com 2 massas ovígeras em cada um, com duração de 10 dias, utilizando um controle e a concentração CENO. Trinta organismos vivos retirados de cada concentração, e dos controles, foram armazenados em freezer – 80ºC, totalizando 210 organismos analisados. Nos ensaios enzimáticos foram utilizados o método baseado em Ellman et al. (1961) modificado para microplaca por Silva de Assis (1998) para a AChE, o método baseado em Valle et al. (2006) para as esterases alfa e beta e o de Bradford (1976) para a quantificação das proteínas totais de cada organismo. Após a análise das atividades enzimáticas de cada concentração e de cada enzima, não foi constatada diferença significativa entre as concentrações do ensaio agudo, apenas entre concentrações relacionadas ao ensaio crônico. Para a EST- ß, a CENO do ensaio crônico teve 19% a menos de atividade que o controle desse mesmo ensaio. Para a EST- a e AChE, respectivamente, a CENO do ensaio crônico teve 39% e 46,5% a menos de atividade do que a mesma concentração do ensaio agudo. Esses dados demonstram que esses três biomarcadores não são sensíveis nesses organismos quando estes são expostos de forma aguda ao hidrocarboneto fenantreno, entretanto, quando comparados à exposição crônica observamos efeitos significativos, evidenciando que efeitos mais severos ocorrem quando os organismos são constantemente expostos ao composto.

 

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