O substrato utilizado na produção de mudas exerce grande influência na qualidade final do produto. Ele deve servir como suporte para o sistema radicular das plantas, apresentando boas condições para reter a umidade e os nutrientes, além de facilitar a aeração. O uso de substratos alternativos ao xaxim para o cultivo de orquídeas poderá proporcionar uma série de benefícios à natureza, como a sua preservação e a reutilização de matérias primas como a fibra de coco. Assim, objetivou-se neste trabalho avaliar a eficácia de diferentes substratos no cultivo de plantas de Laelia tenebrosa e Cattleya brabantiae. Plantas oriundas da germinação in vitro foram transplantadas para bandejas coletivas e aclimatizadas em casa de vegetação. Decorridos aproximadamente nove meses, quando tinham de 2 a 4 cm de comprimento, as plantas de ambas as espécies foram transferidas para vasos de polietileno contendo os substratos: pó de coco, casca de Pinus sp. , pó de coco + casca de Pinus sp. , pó de coco + casca de Pinus sp. + carvão e pó de coco + casca de Pinus sp.+ carvão + casca de nozes. Para o experimento com L. tenebrosa foram utilizadas cinco plantas por vaso e sete repetições e, para C. brabantiae, foram utilizadas duas plantas por vaso com cinco repetições e ambos em delineamento inteiramente casualizado. As plantas foram mantidas em ambiente com 70% de sombreamento e pulverizadas quinzenalmente com solução de Biofert® (5mL.L-1). A irrigação foi realizada de acordo com a umidade do substrato, baseando-se na avaliação visual. Após 360 dias de cultivo foram avaliadas as seguintes variáveis: taxa de sobrevivência, altura da parte aérea, número de folhas e brotos, comprimento e largura das folhas e comprimento da maior raiz. Diferenças significativas foram observadas para o número de brotos, comprimento das folhas e da maior raiz de L. tenebrosa. O número de brotos e o comprimento da raiz foram maiores quando o cultivo das plantas ocorreu em substratos onde houve a mistura de pó de coco + casca de Pinus sp. e pó de coco + casca de Pinus sp.+ carvão + casca de nozes. De modo geral, a mistura de mais de um substrato também resultou em maiores valores de crescimento para C. brabantiae. O número de folhas foi superior e diferente significativamente dos demais tratamentos no substrato a base de pó de coco + casca de Pinus sp., enquanto maiores alturas da parte aérea foram observadas quando cultivo ocorreu nestes substratos com a adição de carvão. Estas misturas provavelmente apresentaram melhor porosidade, ou seja, boa relação entre água e ar, permitindo melhor crescimento.