Aluno de Iniciação Científica: Maurício Portiolli Franco (PIBIC/Fundação Araucária)
Curso: Química
Orientador: Giovana Gioppo Nunes
Co-Orientador: Jaísa Fernandes Soares
Colaborador: Emanuel Maltempi de Souza, Anderson Barison, Eduardo Lemos de Sá
Departamento: Química
Setor: Ciências Exatas
Palavras-chave: vanádio , DNA , PIPES
Área de Conhecimento: 10602003 - QUÍMICA INORGÂNICA

Neste trabalho estamos estudando a reatividade do óxido V10O24·12H2O (A) frente a sua interação com o DNA plasmidial. Em estudos recentes verificamos que A pode atuar tanto como agente quimioprotetor do material genético quanto como nuclease sintética, dependendo das condições experimentais empregadas. Efeitos de degradação do DNA mais expressivos foram observados quando os ensaios foram realizados em tampão PIPES pH 8,0 a 37 °C por 18 h. Os ensaios foram realizados incubando-se 200 ng (0,30 μmol L-1 em pares de base) do plasmídeo pUC19 na sua forma superenovelada (FI) em diferentes concentrações de tampão (25, 50, 100, 150 e 200 mmol L-1) e fixando a quantidade de A em 0,05; 0,5 ou 1,0 mmol L-1. Os resultados das reações foram avaliados por eletroforese em gel de agarose, quantificando-se a percentagem de degradação do DNA nas formas circular aberta (FII) e linear (FIII). As curvas dos tampões revelaram que a atividade nucleásica depende da concentração de A e aumenta com o aumento da concentração do tampão. Uma completa degradação do DNA foi observada quando concentrações de tampão superiores a 50 mmol L1 para [A] = 1,0 mmol L-1, enquanto que efeitos de quebra menos acentuados apresentando 20 % de FII e 10 % de FIII quando [A]= 0,05 mmol L-1. Para auxiliar no entendimento do comportamento de A em PIPES os ensaios foram acompanhados por espectroscopias de EPR e eletrônica (UV-vis). Durante os ensaios verificou-se o desaparecimento da cor verde (inicial da solução), acompanhada do desaparecimento da banda em 786 nm do espectro de UV-vis característica da transição d-d do metal. O espectro de EPR da solução inicial apresenta uma banda alargada centrada em g = 1,958 que desaparece completamente após 18 h. Estes resultados evidenciam a instabilidade de A em PIPES, sugerindo a completa oxidação do vanádio para +5. Uma vez que essa oxidação de A pode estar associada há formação de espécies mais ativas frente à clivagem do plasmídeo foi realizada uma reação (em escala preparativa) entre A e PIPES a 60 °C por 72 horas. Os cristais amarelos (B) foram isolados com 28,5% de rendimento e caracterizados por IV-TF apresentando bandas características de vanadatos (540 e 609 cm-1 (n(V-O-V)) e em  885 e 952 cm-1 (n(V-O)) e por DRX de pó. O padrão de difração de pó apresentado por B é compatível com NaVO3·2H2O (JCPDS Nº 20: 1-0246). O estudo de especiação de soluções de A em PIPES no tempo e a avaliação da interação de B com o DNA em PIPES serão objetos de estudos das próximas etapas do trabalho.

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